腺相关病毒（AAV）作为一种广泛应用的体内基因递送载体，被誉为基因治疗的“黄金载体”。根据医药魔方NextPharma的统计数据，截至2025年1月，全球已有八款AAV基因疗法获批上市，且219项相关疗法正在进行临床研究，显示出惊人的发展潜力。然而，AAV治疗的实施却面临着一个重大的挑战：患者通常只能接受单次治疗。初次注射AAV后，患者会产生免疫反应，从而显著降低后续治疗的效果。因此，如何实现AAV的重复给药已成为基因治疗领域亟需突破的重要难题。

最近，暨南大学的李雯和陈功教授团队在《Molecular Therapy: Methods & Clinical Development》期刊上发表了一篇重要的研究文章，题为《脑内高剂量AAV注射依赖于剂量招募B细胞以抑制AAV的重复给药》。该研究首次系统地阐明了高剂量AAV在脑内注射所诱发的免疫反应，如何显著抑制同种血清型AAV的再次给药，并深入探讨了相关机制及应对策略。

研究背景

在外周组织（如肝脏、肌肉）使用AAV载体进行基因治疗时，“中和抗体（NAbs）”会显著削弱AAV的再次给药效果，这是制约重复给药的主要原因。以往研究中，因神经系统存在血脑屏障，其免疫豁免特性，人们对神经系统的免疫屏障功能认识不足，甚至有部分文献认为脑内AAV注射不会引发类似外周的B细胞反应。

研究亮点

1. 高剂量AAV导致淋巴细胞大量涌入脑实质

研究发现，脑实质注射高剂量AAV后，趋化因子CXCL9和CXCL10的表达显著上调，这些分子如同“免疫信号灯”，吸引淋巴细胞进入脑实质。结果表明，尽管未破坏血脑屏障，脑脊液屏障的通透性却有所增加，大量免疫细胞得以进入脑内，并在血管周围间隙聚集。

2. B细胞分泌的中和抗体是AAV重复给药的主要障碍

首次注射高剂量AAV后，B细胞通过产生大量中和抗体，显著抑制后续同种血清型AAV的表达效率。进一步研究显示，B细胞及其产生的中和抗体在阻碍重复给药中扮演着核心角色。

3. 更换AAV血清型或降低首次给药剂量可有效提升再次给药效果

研究表明，若将第二次AAV血清型更改为不同于首次注射的血清型（如AAV5换为AAV9），可有效避开抗体中和，从而提高AAV的转导效率。此外，适当降低首次注射剂量亦能避免引发大量B细胞应答。

研究结果总结

该研究明确指出，脑内重复给药的抑制与首次注射的剂量及时间间隔高度相关。当首次注射量较高且时间间隔超过14天时，第二次注射的转导效果显著降低。而在首次剂量较低或第二次注射间隔不足一周的情况下，AAV的再转导效果会有所保留。

另一重要发现是，在高剂量AAV注射后，活化的星形胶质细胞会上调多种趋化因子，进一步招募B细胞入脑，产生高滴度抗AAV的中和抗体，这一过程显著抑制了后续同血清型AAV的给药。

未来展望与意义

针对具有“多次给药”需求的脑内基因治疗，建议在治疗初期评估是否需要使用极高载量的AAV。如果条件允许，应选择足够但不过量的病毒剂量，或在后续治疗中调整血清型，以规避已形成的中和抗体。同时，未来的研究应探讨针对B细胞的免疫调控策略，以提高再给药效率。

同时，尊龙凯时非常荣幸能够为本研究提供AAV包装服务，致力于推动基因治疗的发展，并期待未来在这一领域的进一步突破。