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WB样品为何粘稠如“鼻涕”?尊龙凯时教你轻松清除核酸残团,条带立刻清晰!

发布时间:2025-08-05   信息来源:尊龙凯时官方编辑

在进行Western blot实验时,遇到“鼻涕状”样品往往让研究者感到头疼。这种粘稠物质主要由基因组DNA缠绕蛋白形成的“核酸残团”构成。它带来的严重影响包括:移液器堵塞、上清液无法分离、无法顺利加入胶孔、条带拖尾以及蛋白损失。对于生物医疗的研究,这些问题会严重影响实验结果的准确性与可靠性。

WB样品为何粘稠如“鼻涕”?尊龙凯时教你轻松清除核酸残团,条带立刻清晰!

当裂解液与样品混合后,细胞被快速裂解,基因组DNA的双链结构解链,超长DNA链如“章鱼触手”般缠绕在蛋白质、脂滴和细胞碎片上,形成了粘稠的“鼻涕”状态的“核酸残团”。这些残团不仅将样品变得像胶水一样,还会将大量蛋白质拖入不可溶的状态,导致蛋白损失,从而使得Western blot结果失真。

研究者Li利用不同方法提取小鼠脾脏和肝脏的蛋白,对比不同提取方法导致的蛋白质图谱变化。在不同的提取方法中,RIPA提取会形成不可溶的“核酸残团”,而柱式法则能够更好地保留样品中的蛋白质。这些不可溶组分中仍然存在许多蛋白条带,覆盖了整个蛋白质图谱的分子量范围,丢失的蛋白质则会造成蛋白图谱的变化,影响不同种类蛋白的比例。因此,选择合适的提取方法至关重要。

而对于希望获得真实可靠Western blot结果的研究者来说,去除这些粘稠的核酸残团是必须的。超声波技术虽然能够破坏蛋白复合物并改善样品的粘稠状态,但也存在许多缺点,例如产生泡沫、引起热降解和可能导致交叉污染。此外,超声波无法完全将蛋白与核酸分离,因此效果有限。

相比之下,使用尊龙凯时的新一代柱式蛋白提取工具,能够有效地解决这些问题。通过实测对比,我们发现使用RIPA强裂解液提取的样品在SDS-PAGE实验中存在严重的胶孔滞留和条带缺失,而使用柱式法提取的样品则表现更优,胶孔干净且条带锐利,低丰度蛋白也得以完全呈现。由此可见,采纳尊龙凯时的柱式法是提升Western blot成功率的有效方法。

总之,“鼻涕状”样品并不意味着实验的失败,而是提醒我们要重视核酸残团对实验影响的重要性。通过使用尊龙凯时的柱式蛋白提取工具,能够从源头解决问题,确保实验结果的准确性,进而助力生物医疗研究领域的发展。